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思拓凡Cytiva(原GE生命科學)預裝柱
  • 發布日期:2023-06-27      瀏覽次數:2160
    • 思拓凡CytivaGE生命科學)預裝柱

      思拓凡Cytiva(原GE生命科學)的預裝柱和填料是做蛋白純化經常會用到的產品,預裝柱主要分以下幾種


      一、吸附式層析(親和,離子,疏水)通常柱型比較短粗,柱型有HiTrap 1ml(7/25),HiTrap 5ml(16/25),HiPrep 20ml(16/100),HiScreen 4.7ml(7.7/100)幾種。


      1、HiTrap柱型
       
      HiTrap是常用的1ml和5ml柱型。柱高都是相同的25mm,1ml的柱子內徑為7mm,5ml的柱子內徑為16mm。1ml和5ml柱型的選擇可以根據柱子的載量來選擇。通過查找手冊可以查到預裝柱每ml填料可以結合多少蛋白,5ml的柱子可以結合5倍的蛋白。HiTrap預裝柱也可以通過2-3根首尾串聯從而增加上樣量。


      2、HiPrep柱型
       
      HiPrep選用了比HiTRap更大體積的柱型以增加上樣量。HiPrep的柱體積為20ml,柱子內徑為16mm,高度為100mm。


      3、HiScreen柱型
       
      HiScreen柱型的體積為4.7ml,內徑為7.7cmm,柱高100mm。主要用于工藝平臺的方法優化和方案篩選。柱床高度為10cm,通過串聯可以達到20cm。較小的柱型有效降低優化階段樣品的消耗和時間成本,并且在生產中通過放大柱子內徑而不改變高度的方法,可以將參數有效放大至大體積工業生產中。

      二、分子篩的柱型通常比較瘦長。由于是非吸附式層析,分子篩的上樣量一般為柱體積的2%-5%。分子篩的柱型有24ml(10/300),3ml(5/150),3ml(3.2/300),120ml(16/600),320ml(26/600)。


      1、高分辨率半制備型24ml(10/300)
       
      10/300為常規純化中常用柱型。柱體積為24ml,內徑為10mm,柱高300mm。推薦上樣量為25-500ul。Superdex Increase采用10/300的柱型,9um粒徑,在保持較高上樣量的同時,具有超高分辨率。


      2、高分辨率小規模3.2/300
       
      3.2/300具有和10/300相同的柱高和較小的內徑。柱體積為3ml,內徑和柱高分別為3.2mm和300mm。推薦上樣量范圍為4-50ul。采用更小柱體積有利于減少樣品和緩沖液的損耗,并且減少樣品的稀釋。


      3、快速篩選5/150柱型
       
      5/150柱型具有更短的柱床高度。柱床體積為3ml,內徑和柱高為5mm和150mm。推薦上樣量為4-50ul。更短的柱型有利于減少樣品和緩沖液的消耗,并且大大減少篩選時間。在幾分鐘內即可得到有效結果。


      4、大體積16/600和26/600
       
      16/600柱體積為120ml,內徑和柱高分別為16mm和600mm,最大上樣量為5ml。26/600柱體積為320ml,內徑和柱高分別為26mm和600mm,最大上樣量為13ml。如果上樣量比較大,可以考慮這兩種柱型。

       


    魏經理
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